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农学学报 ›› 2011, Vol. 1 ›› Issue (xb1): 5-9.

• 农艺科学 生理生化 • 上一篇    下一篇

利用正交设计优化芦笋SRAP反应体系

李霞 于继庆 李书华 杨林 牟萌   

  • 收稿日期:2011-03-03 修回日期:2011-03-08 出版日期:2011-03-25 发布日期:2011-03-25
  • 基金资助:

    山东省自然科学基金;山东省中青年科学家科研奖励基金

Optimization for SRAP-PCR System of Asparagus Officinalis L. Based on Orthogonal Design

  • Received:2011-03-03 Revised:2011-03-08 Online:2011-03-25 Published:2011-03-25

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摘要：

以芦笋（Asparagus officinalis L.）为材料，对影响SRAP-PCR扩增结果的因素dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、模板DNA进行了正交优化设计的研究。结果表明，适合芦笋SRAP-PCR分析的最佳反应体系：20 μL的反应体积中包括0.2 mmol/L dNTPs 0.4 μL；1 U Taq DNA酶1.0 μL；1.5 mmol/L Mg2+ 1.2 μL；上下引物各30 ng，每个引物0.5 μL；60 ng模板DNA 1.0 μL；10×Buffer 2.0 μL；无菌双蒸水13.4 μL。为今后利用SRAP标记技术研究芦笋的遗传多样性奠定基础。

关键词: 植物体细胞, 植物体细胞, 秋水仙素, 染色体加倍

Abstract:

The factors affecting the SRAP-PCR analysis of Asparagus officinalis, such as concentration of dNTPs, Taq DNA polymerase, Mg2+, primer and template DNA, were optimized by an orthogonal design. It is found that the optimal SRAP-PCR reaction conditions were a reaction system with a total volume of 20 μL, 0.2 mmol/L dNTPs 0.4 μL, 1 U Taq DNA polymerase 1.0 μL, 1.5 mmol/L Mg2+ 1.2 μL, upper and lower primers each 30 ng and each primer 0.5 μL, 60 ng template DNA 1.0 μL, 10×Buffer 2.0 μL, and sterile distilled water 13.4 μL.