宁夏枸杞潮霉素抗性浓度筛选研究

doi:10.11923/j.issn.2095-4050.cjas2020-0017

农学学报 ›› 2022, Vol. 12 ›› Issue (4): 57-60.doi: 10.11923/j.issn.2095-4050.cjas2020-0017

所属专题：生物技术；园艺；农业生态

• 林学/园艺/园林/食用菌 • 上一篇下一篇

宁夏枸杞潮霉素抗性浓度筛选研究

樊云芳¹(), 刘露露², 张晶¹, 罗青¹, 张波¹, 曹有龙¹()

¹宁夏农林科学院枸杞工程技术研究所,银川 750002
²隆德县自然资源局,宁夏固原 756300

收稿日期:2020-04-23 修回日期:2020-09-30 出版日期:2022-04-20 发布日期:2022-05-19
通讯作者: 曹有龙 E-mail:majoriefyf@163.com;youlongchk@163.com
作者简介:樊云芳,女,1981年出生,副研究员,主要从事枸杞分子生物学研究。通信地址：750002 宁夏银川黄河东路590号宁夏农林科学院枸杞工程技术研究所,Tel：0951-6886783,E-mail： majoriefyf@163.com。
基金资助:
宁夏回族自治区全产业链创新示范项目“枸杞功能基因表达与调控分析”(QCYL-2018-04);宁夏回族自治区全产业链创新示范项目“枸杞功能基因表达与调控分析”(YES-16-0403);宁夏农林科学院对外合作项目“特异枸杞资源的呈色机制及调控研究”(DW-X-2018011);国家自然科学基金项目“黑果枸杞花青素苷合成关键酶基因及上游调控序列的克隆与表达分析”(31260351)

Screening on Hygromycin Resistance Concentration of Lycium barbarum

FAN Yunfang¹(), LIU Lulu², ZHANG Jing¹, LUO Qing¹, ZHANG Bo¹, CAO Youlong¹()

¹Lycium Engineering Technology Research Center, Ningxia Academy of Agricultural and Forestry Sciences, Yinchuan 750002, Ningxia, China
²Natural Resources Bureau of Longde County, Guyuan 756300, Ningxia, China

Received:2020-04-23 Revised:2020-09-30 Online:2022-04-20 Published:2022-05-19
Contact: CAO Youlong E-mail:majoriefyf@163.com;youlongchk@163.com

摘要/Abstract

摘要：

研究旨在探索适合枸杞的潮霉素筛选剂量,为枸杞基因功能的研究、遗传转化提供参考。以宁夏枸杞无菌苗叶片为外植体,设置4个潮霉素浓度梯度,研究其对诱导愈伤组织和愈伤组织诱导分化芽的影响,以选出适合枸杞转化体筛选的抗生素剂量。结果表明,随着潮霉素浓度的升高,其对枸杞诱导愈伤组织和愈伤组织诱导芽分化的抑制作用加强。潮霉素浓度越高,枸杞叶片的出愈率越低,愈伤组织的褐化率越高,且叶片逐渐变黄、白化甚至死亡。将潮霉素作为抗性选择标记时,抗性浓度以2 mg/L为最佳。

关键词: 宁夏枸杞, 潮霉素, 抗性浓度, 选择标记, 遗传转化

Abstract:

This study aims to explore the screening dose of hygromycin suitable for Lycium barbarum, and lay a foundation for the study of gene function and genetic transformation of L. barbarum. In this study, the leaves of germless L. barbarum seedlings from Ningxia were used as explants, and four hygromycin concentration gradients were set to study the effect of hygromycin on the induction of callus and callus differentiation buds, to screen out the appropriate antibiotic dose for L. barbarum transformation body screening. The results showed that the increased concentration of hygromycin had a significant inhibitory effect on the induced callus and bud differentiation of L. barbarum. The higher the concentration of hygromycin, the lower the recovering rate of L. barbarum leaves was, and the browning rate of callus increased, and the leaves gradually became yellow, albino, and even died. Using hygromycin as a selective marker for resistance, the optimal concentration of hygromycin is 2 mg/L.

Key words: Lycium barbarum, hygromycin, resistance concentration, selected marker, genetic transformation

中图分类号:

Q789

樊云芳, 刘露露, 张晶, 罗青, 张波, 曹有龙. 宁夏枸杞潮霉素抗性浓度筛选研究[J]. 农学学报, 2022, 12(4): 57-60.

FAN Yunfang, LIU Lulu, ZHANG Jing, LUO Qing, ZHANG Bo, CAO Youlong. Screening on Hygromycin Resistance Concentration of Lycium barbarum[J]. Journal of Agriculture, 2022, 12(4): 57-60.

图/表 4

潮霉素浓度/(mg/L)	出愈率/%	存活率/%	褐化率/%
2	73	93	7
4	60	80	20
6	40	47	53
8	20	40	60

表1. 不同浓度潮霉素对枸杞愈伤组织诱导的影响

图1. 不同浓度潮霉素对枸杞愈伤组织诱导芽的影响 A、B、C、D分别是2、4、6、8 mg/L潮霉素对愈伤组织的诱导情况

潮霉素浓度/(mg/L)	叶色	生芽率/%	芽色	芽长势
2	黄绿色	20	浅绿色	较弱
4	淡黄色	2	白色	基本不生长
6	白化死亡	0	0	0
8	白化死亡	0	0	0

表2. 不同潮霉素浓度对枸杞诱导分化芽的影响

图2. 不同浓度潮霉素诱导分化芽 a、b分别是2、4 mg/L潮霉素诱导分化的芽

参考文献 26

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宁夏枸杞潮霉素抗性浓度筛选研究

Screening on Hygromycin Resistance Concentration of Lycium barbarum

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