番茄ISSR-PCR反应体系的优化与验证

doi:10.11923/j.issn.2095-4050.cjas15080012

农学学报 ›› 2016, Vol. 6 ›› Issue (3): 46-50.doi: 10.11923/j.issn.2095-4050.cjas15080012

所属专题：园艺

番茄ISSR-PCR反应体系的优化与验证

李永平,康建坂,林珲

福建省农业科学院蔬菜研究中心,福建省农业科学院蔬菜研究中心,福建省农业科学院蔬菜研究中心

收稿日期:2015-08-20 修回日期:2015-11-16 接受日期:2015-11-25 出版日期:2016-03-28 发布日期:2016-03-28
通讯作者: 康建坂 E-mail:248937256@qq.com
基金资助:
福建省自然科学基金项目“利用SSR和SRAP标记构建辣椒遗传图谱”(2014J01115)；福建省农业科技重大专项“茄果类蔬菜新品种选育与种业产业化研究”(2013NZ0002-3)。

Optimization and Verification of ISSR-PCR Reaction System for Lycopersicon esculentum

Received:2015-08-20 Revised:2015-11-16 Accepted:2015-11-25 Online:2016-03-28 Published:2016-03-28

摘要/Abstract

摘要： 研究番茄ISSR-PCR反应体系中主要因子TaqDNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板的浓度及各引物的退火温度对扩增结果的影响，建立番茄ISSR- PCR反应的优化体系，为ISSR 技术在番茄分子辅助育种应用提供参考。实验确定番茄ISSR-PCR 20 μL反应体系为：2.0 μL 10×PCR缓冲液，0.3 μmol/L引物，50 ng模板DNA，0.5 mmol/LdNTP，2 U TaqDNA聚合酶，各引物最佳退火温度有所不同。

关键词: 烟剂农药, 烟剂农药, 登记, 使用, 存在问题

Abstract: To study the optimization of ISSR-PCR reaction system for Lycopersicon esculentum, the effects of five main factors (TaqDNA polymerase dosage, dNTP concentration, primer concentration, DNA templates concentration and annealing temperature of each primer) on ISSR amplification were investigated, to lay a foundation for ISSR technique in tomato molecular assisted breeding. The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system (20 μL) contained 50 ng DNA template, 0.3 μmol/L primer, 0.5 mmol/L dNTP, 2 U TaqDNA polymerase, and 2.0 μL 10×PCR buffer. In addition, the optimal annealing temperature of each primer for ISSR-PCR reaction was different.

李永平,康建坂,林珲. 番茄ISSR-PCR反应体系的优化与验证[J]. 农学学报, 2016, 6(3): 46-50.

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番茄ISSR-PCR反应体系的优化与验证

Optimization and Verification of ISSR-PCR Reaction System for Lycopersicon esculentum

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