农学学报 ›› 2022, Vol. 12 ›› Issue (11): 55-61.doi: 10.11923/j.issn.2095-4050.cjas2021-0124
• 农业工程/农业机械/生物技术/食品科学 • 上一篇 下一篇
收稿日期:
2021-07-08
修回日期:
2021-09-13
出版日期:
2022-11-20
发布日期:
2023-01-11
通讯作者:
鄢铮
E-mail:ahjane@163.com;moosey@163.com
作者简介:
张小红,女,1979年出生,福建厦门人,副研究员,硕士,主要从事作物良种选育与栽培机理研究。通信地址:350018福建省福州市仓山区城门镇福州市农业科学研究所,Tel:0591-83508673,E-mail:ahjane@163.com。
基金资助:
ZHANG Xiaohong(), PENG Qiong, YAN Zheng()
Received:
2021-07-08
Revised:
2021-09-13
Online:
2022-11-20
Published:
2023-01-11
Contact:
YAN Zheng
E-mail:ahjane@163.com;moosey@163.com
摘要:
旨在对甘薯耐盐转录组中潜在的SSR和SNP位点进行挖掘及特征分析,以完善甘薯分子标记。试验以不同耐盐甘薯品种的转录组序列为基础,利用MISA、GATK软件分析了转录本中的SSR和SNP信息。结果显示,研究共获得SSR位点33192个,分布在24323条Unigenes中,出现频率为21.11%。其中,6271条Unigenes含有超过1个以上的SSR位点。SSR类型以单核苷酸重复SSR和双核苷酸重复SSR为主。在重复基元中,A/T和AG/CT所占的比例最高,为优势基元。在157252条Unigenes中共挖掘到SNP位点7691906个,分布密度为0.08个/bp。其中转换类型有4729922个,颠换类型有2961984个。在所有突变类型中,C/T和A/G含量最高,分别为占总数的32.34%和29.15%。综上所述,甘薯转录组具有较丰富的SSR和SNP标记,多态性较高,可为甘薯抗逆品种筛选、种质培育等研究奠定理论基础。
中图分类号:
张小红, 彭琼, 鄢铮. 基于甘薯耐盐转录组测序的SSR和SNP特征分析[J]. 农学学报, 2022, 12(11): 55-61.
ZHANG Xiaohong, PENG Qiong, YAN Zheng. SSR and SNP in Salt Tolerant Sweet Potato: Characteristics Analysis Based on Transcriptome Sequencing[J]. Journal of Agriculture, 2022, 12(11): 55-61.
项目 | 数量 |
---|---|
评估的序列数目 | 157252 |
评估的序列总碱基数 (bp) | 90649057 |
识别的SSR总数 | 33192 |
包含SSR的序列数目 | 24323 |
包含1个以上SSR的序列数目 | 6271 |
以复合物形式存在的SSR数目 | 4471 |
单核苷酸重复SSR数目 | 18718 |
双核苷酸重复SSR数目 | 8121 |
三核苷酸重复SSR数目 | 5565 |
四核苷酸重复SSR数目 | 601 |
五核苷酸重复SSR数目 | 129 |
六核苷酸重复SSR数目 | 58 |
项目 | 数量 |
---|---|
评估的序列数目 | 157252 |
评估的序列总碱基数 (bp) | 90649057 |
识别的SSR总数 | 33192 |
包含SSR的序列数目 | 24323 |
包含1个以上SSR的序列数目 | 6271 |
以复合物形式存在的SSR数目 | 4471 |
单核苷酸重复SSR数目 | 18718 |
双核苷酸重复SSR数目 | 8121 |
三核苷酸重复SSR数目 | 5565 |
四核苷酸重复SSR数目 | 601 |
五核苷酸重复SSR数目 | 129 |
六核苷酸重复SSR数目 | 58 |
重复类型 | 重复基元类型总数 | 重复基元 | 数量 | 占比/% |
---|---|---|---|---|
单核苷酸重复 | 2 | A/T | 18391 | 55.41 |
C/G | 327 | 0.99 | ||
双核苷酸重复 | 4 | AG/CT | 3706 | 11.17 |
AT/AT | 3185 | 9.60 | ||
AC/GT | 1220 | 3.68 | ||
CG/CG | 10 | 0.03 | ||
三核苷酸重复 | 10 | AAT/ATT | 1606 | 4.84 |
AAG/CTT | 1325 | 3.99 | ||
ATC/ATG | 603 | 1.82 | ||
CCG/CGG | 585 | 1.76 | ||
AAC/GTT | 459 | 1.38 | ||
剩余三核苷酸重复基元 | 987 | 2.97 | ||
四核苷酸重复 | 28 | AAAT/ATTT | 231 | 0.70 |
AAAG/CTTT | 89 | 0.27 | ||
ACAT/ATGT | 65 | 0.20 | ||
AAAC/GTTT | 56 | 0.17 | ||
剩余四核苷酸重复基元 | 160 | 0.48 | ||
五核苷酸重复 | 40 | AAAAT/ATTTT | 31 | 0.09 |
AAAAC/GTTTT | 28 | 0.08 | ||
AAAAG/CTTTT | 9 | 0.03 | ||
AAGAG/CTCTT | 9 | 0.03 | ||
剩余五核苷酸重复基元 | 52 | 0.16 | ||
六核苷酸重复 | 36 | AAAAAC/GTTTTT | 6 | 0.02 |
AAAAAT/ATTTTT | 6 | 0.02 | ||
AAAGAG/CTCTTT | 3 | 0.01 | ||
AAAGGC/CCTTTG | 2 | 0.01 | ||
剩余六核苷酸重复基元 | 41 | 0.12 |
重复类型 | 重复基元类型总数 | 重复基元 | 数量 | 占比/% |
---|---|---|---|---|
单核苷酸重复 | 2 | A/T | 18391 | 55.41 |
C/G | 327 | 0.99 | ||
双核苷酸重复 | 4 | AG/CT | 3706 | 11.17 |
AT/AT | 3185 | 9.60 | ||
AC/GT | 1220 | 3.68 | ||
CG/CG | 10 | 0.03 | ||
三核苷酸重复 | 10 | AAT/ATT | 1606 | 4.84 |
AAG/CTT | 1325 | 3.99 | ||
ATC/ATG | 603 | 1.82 | ||
CCG/CGG | 585 | 1.76 | ||
AAC/GTT | 459 | 1.38 | ||
剩余三核苷酸重复基元 | 987 | 2.97 | ||
四核苷酸重复 | 28 | AAAT/ATTT | 231 | 0.70 |
AAAG/CTTT | 89 | 0.27 | ||
ACAT/ATGT | 65 | 0.20 | ||
AAAC/GTTT | 56 | 0.17 | ||
剩余四核苷酸重复基元 | 160 | 0.48 | ||
五核苷酸重复 | 40 | AAAAT/ATTTT | 31 | 0.09 |
AAAAC/GTTTT | 28 | 0.08 | ||
AAAAG/CTTTT | 9 | 0.03 | ||
AAGAG/CTCTT | 9 | 0.03 | ||
剩余五核苷酸重复基元 | 52 | 0.16 | ||
六核苷酸重复 | 36 | AAAAAC/GTTTTT | 6 | 0.02 |
AAAAAT/ATTTTT | 6 | 0.02 | ||
AAAGAG/CTCTTT | 3 | 0.01 | ||
AAAGGC/CCTTTG | 2 | 0.01 | ||
剩余六核苷酸重复基元 | 41 | 0.12 |
重复类型 | 重复次数 | 总计 | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | >12 | ||
单核苷酸 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 5667 | 3174 | 2122 | 7755 | 18718 |
双核苷酸 | 0 | 2679 | 1579 | 1104 | 711 | 512 | 536 | 590 | 410 | 8121 |
三核苷酸 | 2930 | 1283 | 591 | 265 | 59 | 71 | 58 | 52 | 256 | 5565 |
四核苷酸 | 415 | 146 | 12 | 11 | 4 | 6 | 2 | 3 | 2 | 601 |
五核苷酸 | 99 | 16 | 9 | 4 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 129 |
六核苷酸 | 26 | 15 | 10 | 4 | 1 | 0 | 1 | 0 | 1 | 58 |
总计 | 3470 | 4139 | 2201 | 1388 | 775 | 6256 | 3772 | 2767 | 8424 | 33192 |
重复类型 | 重复次数 | 总计 | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | >12 | ||
单核苷酸 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 5667 | 3174 | 2122 | 7755 | 18718 |
双核苷酸 | 0 | 2679 | 1579 | 1104 | 711 | 512 | 536 | 590 | 410 | 8121 |
三核苷酸 | 2930 | 1283 | 591 | 265 | 59 | 71 | 58 | 52 | 256 | 5565 |
四核苷酸 | 415 | 146 | 12 | 11 | 4 | 6 | 2 | 3 | 2 | 601 |
五核苷酸 | 99 | 16 | 9 | 4 | 0 | 0 | 1 | 0 | 0 | 129 |
六核苷酸 | 26 | 15 | 10 | 4 | 1 | 0 | 1 | 0 | 1 | 58 |
总计 | 3470 | 4139 | 2201 | 1388 | 775 | 6256 | 3772 | 2767 | 8424 | 33192 |
SSR长度分布 | 数量 | 占比/% |
---|---|---|
小于12 bp | 6803 | 23.69 |
12~20 bp | 14075 | 49.01 |
21~30 bp | 3647 | 12.70 |
31~40 bp | 943 | 3.28 |
41~50 bp | 573 | 2.00 |
51~60 bp | 390 | 1.36 |
61~70 bp | 229 | 0.80 |
71~80 bp | 188 | 0.65 |
80~553 bp | 1873 | 6.52 |
SSR长度分布 | 数量 | 占比/% |
---|---|---|
小于12 bp | 6803 | 23.69 |
12~20 bp | 14075 | 49.01 |
21~30 bp | 3647 | 12.70 |
31~40 bp | 943 | 3.28 |
41~50 bp | 573 | 2.00 |
51~60 bp | 390 | 1.36 |
61~70 bp | 229 | 0.80 |
71~80 bp | 188 | 0.65 |
80~553 bp | 1873 | 6.52 |
重复基元 | 左边引物(5’-3’) | 右边引物(5’-3’) | 产物大小/bp |
---|---|---|---|
(T)21 | TCTTGTTGAAGCCATGCACA | CTGGAAAGCACAATGACCATG | 178 |
(AT)11 | TGTCCACATTTGAACACACACA | TCAGACCAGAACATGCACCT | 114 |
(AAC)7 | ACCGGTGTGTTTCTTGATGC | CCCAATGTACTCCGAGCAGA | 273 |
(TTGT)6 | TCACCCCTCTGTAACGCTTT | AGCCTTCAATCTTCCCGTCT | 294 |
(GATCC)5 | GTTTGGTTCTGTACAGCCCG | GACATGGGCTGCTCACATTC | 101 |
(TGAAAT)5 | TGTAGACGCCTGTAGTTGCA | TCCTTTGCATCCACCACTGA | 176 |
重复基元 | 左边引物(5’-3’) | 右边引物(5’-3’) | 产物大小/bp |
---|---|---|---|
(T)21 | TCTTGTTGAAGCCATGCACA | CTGGAAAGCACAATGACCATG | 178 |
(AT)11 | TGTCCACATTTGAACACACACA | TCAGACCAGAACATGCACCT | 114 |
(AAC)7 | ACCGGTGTGTTTCTTGATGC | CCCAATGTACTCCGAGCAGA | 273 |
(TTGT)6 | TCACCCCTCTGTAACGCTTT | AGCCTTCAATCTTCCCGTCT | 294 |
(GATCC)5 | GTTTGGTTCTGTACAGCCCG | GACATGGGCTGCTCACATTC | 101 |
(TGAAAT)5 | TGTAGACGCCTGTAGTTGCA | TCCTTTGCATCCACCACTGA | 176 |
样品 | 转换(ts) | 颠换(tv) | ts总计 | tv总计 | ts/tv | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
C/T | A/G | A/C | C/G | A/T | G/T | |||||
R1-1 | 134880 | 121552 | 35520 | 38897 | 42519 | 43674 | 256432 | 160610 | 1.60 | |
R1-2 | 137881 | 124344 | 36208 | 39475 | 43916 | 44948 | 262225 | 164547 | 1.59 | |
R1-3 | 140688 | 126718 | 37118 | 40497 | 44701 | 45847 | 267406 | 168163 | 1.59 | |
R2-1 | 138223 | 124636 | 36477 | 39909 | 44153 | 44997 | 262859 | 165536 | 1.59 | |
R2-2 | 136910 | 123896 | 36032 | 39842 | 43129 | 44383 | 260806 | 163386 | 1.60 | |
R2-3 | 140818 | 126863 | 37027 | 40469 | 44727 | 45968 | 267681 | 168191 | 1.59 | |
R3-1 | 134739 | 121074 | 35394 | 38506 | 42890 | 43757 | 255813 | 160547 | 1.59 | |
R3-2 | 139800 | 125736 | 36718 | 40436 | 44658 | 45463 | 265536 | 167275 | 1.59 | |
R3-3 | 140283 | 125966 | 37003 | 40585 | 44595 | 45838 | 266249 | 168021 | 1.58 | |
T1-1 | 147287 | 132992 | 38811 | 42658 | 46693 | 47705 | 280279 | 175867 | 1.59 | |
T1-2 | 144135 | 130098 | 37959 | 41796 | 45485 | 46632 | 274233 | 171872 | 1.60 | |
T1-3 | 143284 | 129222 | 37588 | 41316 | 45162 | 46448 | 272506 | 170514 | 1.60 | |
T2-1 | 145806 | 131426 | 38345 | 41810 | 46092 | 47168 | 277232 | 173415 | 1.60 | |
T2-2 | 141297 | 127971 | 36617 | 39917 | 43368 | 44905 | 269268 | 164807 | 1.63 | |
T2-3 | 118760 | 106985 | 30909 | 34028 | 36845 | 38068 | 225745 | 139850 | 1.61 | |
T3-1 | 138465 | 124460 | 36399 | 39739 | 43725 | 45064 | 262925 | 164927 | 1.59 | |
T3-2 | 139878 | 125796 | 36683 | 40467 | 43928 | 45131 | 265674 | 166209 | 1.60 | |
T3-3 | 124640 | 112413 | 32876 | 35800 | 39352 | 40219 | 237053 | 148247 | 1.60 | |
总计 | 2487774 | 2242148 | 653684 | 716147 | 785938 | 806215 | 4729922 | 2961984 | 1.60 |
样品 | 转换(ts) | 颠换(tv) | ts总计 | tv总计 | ts/tv | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
C/T | A/G | A/C | C/G | A/T | G/T | |||||
R1-1 | 134880 | 121552 | 35520 | 38897 | 42519 | 43674 | 256432 | 160610 | 1.60 | |
R1-2 | 137881 | 124344 | 36208 | 39475 | 43916 | 44948 | 262225 | 164547 | 1.59 | |
R1-3 | 140688 | 126718 | 37118 | 40497 | 44701 | 45847 | 267406 | 168163 | 1.59 | |
R2-1 | 138223 | 124636 | 36477 | 39909 | 44153 | 44997 | 262859 | 165536 | 1.59 | |
R2-2 | 136910 | 123896 | 36032 | 39842 | 43129 | 44383 | 260806 | 163386 | 1.60 | |
R2-3 | 140818 | 126863 | 37027 | 40469 | 44727 | 45968 | 267681 | 168191 | 1.59 | |
R3-1 | 134739 | 121074 | 35394 | 38506 | 42890 | 43757 | 255813 | 160547 | 1.59 | |
R3-2 | 139800 | 125736 | 36718 | 40436 | 44658 | 45463 | 265536 | 167275 | 1.59 | |
R3-3 | 140283 | 125966 | 37003 | 40585 | 44595 | 45838 | 266249 | 168021 | 1.58 | |
T1-1 | 147287 | 132992 | 38811 | 42658 | 46693 | 47705 | 280279 | 175867 | 1.59 | |
T1-2 | 144135 | 130098 | 37959 | 41796 | 45485 | 46632 | 274233 | 171872 | 1.60 | |
T1-3 | 143284 | 129222 | 37588 | 41316 | 45162 | 46448 | 272506 | 170514 | 1.60 | |
T2-1 | 145806 | 131426 | 38345 | 41810 | 46092 | 47168 | 277232 | 173415 | 1.60 | |
T2-2 | 141297 | 127971 | 36617 | 39917 | 43368 | 44905 | 269268 | 164807 | 1.63 | |
T2-3 | 118760 | 106985 | 30909 | 34028 | 36845 | 38068 | 225745 | 139850 | 1.61 | |
T3-1 | 138465 | 124460 | 36399 | 39739 | 43725 | 45064 | 262925 | 164927 | 1.59 | |
T3-2 | 139878 | 125796 | 36683 | 40467 | 43928 | 45131 | 265674 | 166209 | 1.60 | |
T3-3 | 124640 | 112413 | 32876 | 35800 | 39352 | 40219 | 237053 | 148247 | 1.60 | |
总计 | 2487774 | 2242148 | 653684 | 716147 | 785938 | 806215 | 4729922 | 2961984 | 1.60 |
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